专利简介

一种细胞表面蛋白的分离纯化方法及应用

简介
本发明提供一种细胞表面蛋白的分离纯化方法及应用。该方法包括：培养获得待分离的细胞，向细胞中加入叠氮化物溶液进行孵育反应，接着加入Tris-HCl缓冲液终止反应，实现细胞表面蛋白叠氮化物的标记；接着加入TNTE缓冲液和蛋白酶抑制剂裂解细胞，离心后得到叠氮化物标记的细胞裂解物；叠氮化物标记的细胞裂解物与膦-生物素-链霉亲和素磁珠进行孵育，富集出叠氮化物标记的细胞表面蛋白，得到含有细胞表面蛋白的磁珠。本发明的方法能够有效分离细胞表面蛋白，具有低背景、高效率和良好的重复性；能够应用于定量分析细胞表面蛋白质组。

简介

本发明提供一种细胞表面蛋白的分离纯化方法及应用。该方法包括：培养获得待分离的细胞，向细胞中加入叠氮化物溶液进行孵育反应，接着加入Tris-HCl缓冲液终止反应，实现细胞表面蛋白叠氮化物的标记；接着加入TNTE缓冲液和蛋白酶抑制剂裂解细胞，离心后得到叠氮化物标记的细胞裂解物；叠氮化物标记的细胞裂解物与膦-生物素-链霉亲和素磁珠进行孵育，富集出叠氮化物标记的细胞表面蛋白，得到含有细胞表面蛋白的磁珠。本发明的方法能够有效分离细胞表面蛋白，具有低背景、高效率和良好的重复性；能够应用于定量分析细胞表面蛋白质组。