| 简介 | 本发明提供了一种用于基因突变检测的发夹式扩增阻断法的引物和探针及其应用。本发明提供的引物和探针包括通用引物A、通用引物B和野生型阻断探针P；通用引物A和B用于扩增含有靶突变位点的靶序列，与野生型靶序列W和扩增的突变靶序列M完全互补；野生型阻断探针P与通用引物A的延伸的野生型靶序列W完全互补，并且部分互补于通用引物A的延伸的突变靶序列M；野生型阻断探针P的互补位点的5'端与通用引物B的互补位点的3'端部分重叠；优选探针P以其3'端通过共价基团与引物A的5'端结合形成野生型阻断探针P-通用引物A复合物的形式存在。本发明的技术可用于基因突变的快速检测，灵敏度小于1%。 |
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